稀釋水的質(zhì)量對BOD5的測定結(jié)果的準(zhǔn)確性意義重大，因此要求稀釋水空白5日耗氧必須小于0.2mg/L，最好能控制在0.1mg/L以下，接種稀釋水5日耗氧應(yīng)在0.3~1.0mg/L之間。
保證稀釋水質(zhì)量的關(guān)鍵在于控制其有機(jī)物的含量最低和抑制微生物繁殖的物質(zhì)含量最低，因此最好使用蒸餾水作為稀釋水，不宜使用離子交換樹脂制得的純水作為稀釋水，因?yàn)槿ルx子水往往含有從樹脂中分離出的有機(jī)物。如果制備蒸餾水的自來水中含有某些揮發(fā)性有機(jī)物，為預(yù)防其殘留在蒸餾水中，就應(yīng)在蒸餾前進(jìn)行去除有機(jī)物的預(yù)處理。由金屬蒸餾器制得的蒸餾水，應(yīng)注意檢查其中的金屬離子含量，以免發(fā)生抑制微生物的繁殖和代謝，影響B(tài)OD5測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如果所用稀釋水因含有有機(jī)物而不符合使用要求時(shí)，可采取加入適量曝氣池接種液后，在室溫或20℃條件下貯存一定時(shí)間的方法予以消除影響。接種的量以5d耗氧約0.1mg/L為原則，為防止藻類繁殖，貯存必須在暗室中進(jìn)行。如果貯存后的稀釋水有沉渣，只能取用上清液，可過濾去除沉渣。
為確保稀釋水的溶解氧接近飽和，必要時(shí)可用真空泵或水射器吸入經(jīng)凈化的空氣，也可用微型空壓機(jī)注入經(jīng)凈化的空氣，還可用氧氣瓶通入純氧，然后將經(jīng)過充氧的稀釋水在20℃培養(yǎng)箱中放置一定時(shí)間，使溶解氧達(dá)到平衡。冬季在較低室溫放置的稀釋水可能含有過多的溶解氧，夏季高溫季節(jié)則恰好相反，因此在室溫與20℃有明顯差別時(shí)，一定要放置在培養(yǎng)箱內(nèi)穩(wěn)定一段時(shí)間，使之和培養(yǎng)環(huán)境的氧分壓平衡。
對有硝化效果的污水處理系統(tǒng)的出水進(jìn)行BOD5測量時(shí)，由于其中含有許多硝化細(xì)菌，測定成果中就包含了氨氮等含氮物質(zhì)的需氧量。
一般BOD5（五日生化需氧量）常用的是稀釋法，選擇原樣品或經(jīng)適當(dāng)稀釋的樣品進(jìn)行測定，然后用適當(dāng)?shù)谋稊?shù)進(jìn)行稀釋，使培養(yǎng)瓶中有足夠的溶解氧以滿足五日生化的需氧要求。將滿足上述條件的樣品分成兩份，一份測定當(dāng)天的溶解氧質(zhì)量濃度，另一份放入20攝氏度的培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)5天后再檢測溶解氧的質(zhì)量濃度，這兩種樣品的差就是五日生化需氧量，即BOD5。
BOD是水體中的好氧微生物在一定溫度下將水中有機(jī)物分解成無機(jī)質(zhì)，這一特定時(shí)間內(nèi)的氧化過程中所需要的溶解氧量，是表示水中有機(jī)物等需氧污染物質(zhì)含量的一個綜合指標(biāo)。但是污水中各種有機(jī)物得到完會氧化分解的時(shí)間，總共約需一百天，為了縮短檢測時(shí)間，一般生化需氧量以被檢驗(yàn)的水樣在20℃下，五天內(nèi)的耗氧量為代表，稱其為五日生化需氧量，簡稱BOD5，對生活污水來說，它約等于完全氧化分解耗氧量的70%。
無論使用哪中方法，在將水樣引入培養(yǎng)瓶時(shí)，動作必須要輕緩，避免發(fā)生氣泡，以防空氣溶入水中或水中氧氣溢出。同時(shí)要保證在蓋緊瓶蓋時(shí)一定要細(xì)心，避免瓶內(nèi)留有氣泡而影響測定結(jié)果。培養(yǎng)瓶在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時(shí)，每天都要檢查其水封情況，及時(shí)填水，以防止封口水份蒸干而使瓶內(nèi)進(jìn)入空氣。此外，5d前后使用的兩個培養(yǎng)瓶的體積必須相同，以減小誤差。
水質(zhì)BOD是指在有氧的條件下，水中微生物分解有機(jī)物的生物化學(xué)過程中所需溶解氧的質(zhì)量濃度。為了使水質(zhì)BOD檢測數(shù)值有可比性，一般規(guī)定一個時(shí)間周期，并測定水中溶解氧消耗情況，一般采用五天時(shí)間，稱為五日生化需氧量，記做BOD5。水質(zhì)BOD是一種環(huán)境監(jiān)測指標(biāo)，用于監(jiān)測水中有機(jī)物污染情況，有機(jī)物都可以被微生物分解，此過程中需要消耗氧，如果水中溶解氧不足以供給微生物的需要，水體就處理污染狀態(tài)。
生活污水與工業(yè)廢水含有大量有機(jī)物，這些有機(jī)物在水體中分解時(shí)要消耗大量溶解氧，從而破壞水體中氧的平衡，使水質(zhì)惡化。生化需氧量是屬于利用水中有機(jī)物在一定條件下所消耗的氧，用來表示水體中有機(jī)物的含量的一個重要指標(biāo)。
水作為一種資源，根據(jù)其用途，不僅有量的要求，還必須有質(zhì)的要求，人類在生產(chǎn)與生活活動中，將大量的工業(yè)廢水、生活污水及其他廢棄物排入水體，造成地表水和地下水等水源的污染，引起水質(zhì)惡化，從而影響人體健康。所以，人們在水環(huán)境方面所面臨的問題是必須充分合理地保護(hù)、使用和改善水資源，使其不受或少受污染。水質(zhì)監(jiān)測正是以此為目的，以海洋、江、河、湖泊、水庫、地下水等水體和工業(yè)廢水、生活污水的排放口為對象而進(jìn)行監(jiān)督、檢測，以檢查水的質(zhì)量是否符合國家規(guī)定的有關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及排放標(biāo)準(zhǔn)要求，為控制水污染、保護(hù)水資源提供依據(jù)。
化學(xué)需氧量（COD）是指廢水中氧化物質(zhì)被化學(xué)氧化劑氧化時(shí)所需的氧量，以氧毫克/升為單位。這是目前測定廢水中有機(jī)物含量最普遍的手段。COD分析中常用的氧化劑有高錳酸鉀（錳法comn）和重鉻酸鉀（鉻法CODcr），現(xiàn)在常用重鉻酸鉀法。廢水在強(qiáng)酸加熱沸騰回流的條件下氧化有機(jī)物，以硫酸銀為催化劑時(shí)，大部分有機(jī)物的氧化率可提高到85-95%。廢水中含有高濃度氯離子時(shí)，應(yīng)該用硫酸汞切斷氯離子，減少COD的測定干擾。
生活污水與工業(yè)廢水中含有大量各類有機(jī)物。當(dāng)其污染水域后，這些有機(jī)物在水體中分解時(shí)要消耗大量溶解氧，從而破壞水體中氧的平衡，使水質(zhì)惡化。水體因缺氧造成魚類及其他水生生物的死亡。水體中所含的有機(jī)物成分復(fù)雜，難以一一測定其成分。人們常常利用水中有機(jī)物在一定條件下所消耗的氧，來間接表示水體中有機(jī)物的含量，生化需氧量即屬于這類的一個重要指標(biāo)。
一般常見的生活污水處理都是含磷量比較高，且除磷技術(shù)也較先進(jìn)，但是針對BOD5的去除就較少掌握。通過對生活污水BOD5的了解，主要是生處理去除是靠微生物的吸附作用和代謝作用，然后對污泥與水進(jìn)行分離來完成的。
